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技術(shù)支持

對(duì)于顯色液的使用你做的正確嗎?看這里
更新時(shí)間:2020-09-26   點(diǎn)擊次數(shù):2973次
  顯色液是一種采用了較新單一溶液顯色技術(shù),通過(guò)辣根過(guò)氧化物酶(HRP)催化TMB顯色,用于ELISA等的顯色液。本顯色液也可以用于檢測(cè)血液或血紅蛋白等樣品中的過(guò)氧化物酶含量。
 
  通常的顯色試劑由多個(gè)組份組成,必須在使用前進(jìn)行配制,并且容易產(chǎn)生沉淀,使用相對(duì)不太方便,并且也容易導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不太穩(wěn)定。本顯色液采用了較新的顯色技術(shù),把所有的相關(guān)試劑全部配制在一個(gè)溶液中,僅由單一溶液組成,簡(jiǎn)化了操作步驟,并且使檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。
 
  顯色液的使用方法:
 
  用適當(dāng)?shù)母蓛羧萜?用純凈水反復(fù)沖洗),倒出適量的單組分TMB顯色液,待達(dá)到室溫后即可使用。
 
  加液:加完HRP結(jié)合物并孵育一定時(shí)間后,用適當(dāng)洗滌液洗板3-5次,每孔加TMB顯色液100ul。 根據(jù)個(gè)人實(shí)驗(yàn)需要,在室溫(15-25℃)或37℃下避光溫育10-30分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間,直至顯色至預(yù)期深淺。
 
  終止:加入等體積的1M 鹽酸或硫酸溶液終止反應(yīng),孔中反應(yīng)液由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
 
  讀數(shù):終止反應(yīng)后30分鐘內(nèi)在450nm處測(cè)定吸光值。
 
  注意:如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景或沉淀,表明TMB底物反應(yīng)過(guò)于強(qiáng)烈。為了避免產(chǎn)生沉淀,可在終止后馬上讀數(shù);或者進(jìn)一步稀釋一抗和/或HRP結(jié)合物。

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